Nombre Parcourir:0 auteur:Éditeur du site publier Temps: 2021-05-12 origine:Propulsé
La PCR, ou réaction en chaîne par polymérase, est une technique courante utilisée dans les laboratoires de recherche traitant de l'ADN, permettant aux chercheurs et aux techniciens de reproduire un seul échantillon d'ADN des millions de fois.Cela favorise bien sûr l’analyse et la recherche efficaces de sections d’ADN particulières.La technique a été développée dans les années 1980, mais en peu de temps, elle a déjà contribué à une myriade de réalisations en recherche.
La PCR a été développée en 1983 par un biochimiste américain nommé Kary Mullis, qui a ensuite reçu un prix Nobel pour les améliorations et les découvertes qu'il a réalisées dans le domaine de la chimie.La PCR permet de réaliser des millions de copies d’un seul petit échantillon d’ADN.Les chercheurs en médecine et en biologie utilisent la PCR pour identifier des gènes spécifiques, détecter des agents pathogènes et créer un profil ADN pour des applications médico-légales.
Pour exécuter efficacement la technique PCR, quelques ingrédients principaux sont nécessaires.Tout d’abord – et surtout – vous avez besoin de l’échantillon d’ADN qui sera copié.Vient ensuite l’amorce, qui lance le processus PCR.Ces amorces sont de courtes séquences d'ADN qui se lient de chaque côté de l'échantillon d'ADN en cours de réplication.Vous aurez également besoin de bases nucléotidiques d'ADN, de l'enzyme Taq polymérase et d'un tampon pour créer une réaction efficace.
Le processus de cycle thermique
Le processus PCR lui-même est effectué via un cycle thermique, un processus de chauffage et de refroidissement qui crée les conditions nécessaires à la réplication de l'ADN.Le cycle thermique pour la PCR implique trois phases : dénaturation, recuit et extension.
·Dénaturation : La première étape du processus de cycle thermique pour la PCR est la dénaturation.Cela chauffe l'échantillon d'ADN jusqu'à un point où l'échantillon double brin se découple pour créer deux brins d'ADN individuels.
·Anneau : Après le chauffage initial pour la dénaturation, la température est abaissée, ce qui donne aux amorces d'ADN la possibilité de fixer l'ADN de l'échantillon par recuit.
·Extension : L'extension implique une autre augmentation de température.Cette augmentation finale de la température permet à l’enzyme Taq polymérase de répliquer réellement l’ADN matrice.
Chacune de ces trois phases du processus de cyclage thermique est répétée entre 20 et 40 fois.Chaque cycle successif entraîne le doublement des copies d’ADN.La durée du cycle thermique varie en fonction du volume de l'échantillon et de l'équipement spécifique utilisé, mais elle prend généralement entre une et quatre heures.Après le cycle thermique, une électrophorèse peut être réalisée pour analyser les échantillons et mener des recherches plus approfondies.
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