Comment utiliser la solution mère de glycérol pour la culture bactérienne

Les stocks bactériens de glycérol (BGS) sont fondamentaux pour le stockage à long terme.Selon le référentiel Addgene, il s’agit du moyen le plus efficace de stocker indéfiniment des échantillons.Alors que les bactéries sur une plaque de gélose peuvent normalement être conservées au réfrigérateur et durent quelques semaines, le stockage des bactéries dans un tube contenant du glycérol les stabilisera, évitant ainsi les dommages sur la membrane cellulaire.BGS maintient les cellules vivantes, viables et permet un stockage à long terme.

En recherche, le stockage des échantillons de laboratoire remplit une fonction principale : préserver leur crédibilité pour l’analyse.L’une des techniques les plus utiles pour y parvenir est la congélation.

CONSERVATION ET STOCKAGE DES ÉCHANTILLONS

La congélation des cultures bactériennes à elle seule peut endommager les échantillons.Les cristaux de glace formés déshydrateront les bactéries et l'augmentation localisée de la concentration en sel qui en résulte entraînera la dénaturation des protéines.Cependant, lorsqu’il est congelé avec du glycérol, il atténue les effets nocifs provoqués par les cristaux de glace chez les bactéries.La relance de votre culture bactérienne à partir de stocks de glycérol vous permet de réutiliser facilement votre échantillon stocké.

Les stocks de congélateur servent de collection de cultures contenues dans 50 % de glycérol et conservées dans un congélateur à ultra basse température à -80 °C.L’intégrité des échantillons lors d’un stockage à long terme à des températures ultra-basses est d’une importance capitale et nécessite un équipement conçu pour répondre à des besoins spécifiques, notamment un échauffement lent en cas de panne de courant et une efficacité énergétique.

Pour garantir la viabilité, chaque échantillon est conservé dans un environnement stable et fiable et est continuellement surveillé pour garantir que les températures optimales sont maintenues pendant de nombreuses années.Ces échantillons peuvent ensuite être transférés dans des milieux de culture pour leur permettre de passer d’une seule cellule bactérienne à de grandes colonies.L’utilisation appropriée d’une enceinte de sécurité assurant la protection du produit est essentielle lorsqu’il s’agit de préparation de milieux de culture.

PRÉPARATION DES MÉDIAS CULTURELS

Les enceintes à flux laminaire vertical offrent une protection optimale du produit qui peut être utilisée pour la préparation du milieu de culture afin d'éviter toute contamination.Une fois la préparation des milieux de culture terminée, s’ensuit l’inoculation des micro-organismes par la méthode des stries.Cependant, les agents biologiques peuvent présenter des risques biologiques pour les opérateurs, ce qui nécessite grandement la protection des utilisateurs, des produits et de l'environnement.

MANIPULATION DES MICRO-ORGANISMES

Les enceintes de sécurité biologique assurent la protection de l'utilisateur, du produit et de l'environnement lorsque vous travaillez avec des micro-organismes pathogènes grâce au mécanisme de circulation d'air à l'intérieur de l'enceinte.Cela garantira que même le plus petit micro-organisme ne présentera pas de danger pour la santé.Une petite quantité d’échantillon du stock de glycérol est étalée sur une plaque de gélose fraîchement préparée pour être cultivée pour une analyse plus approfondie.
L’utilisation d’un équipement de laboratoire approprié pour chaque application est un facteur de qualité essentiel.